ICS11.020 CCSC05 中华人民共和国国家标准 GB/T26352—2026 代替GB/T26352—2010 蜚蠊抗药性检测方法 德国小蠊生物测定法 Testmethodsofcockroachresistancetoinsecticides— ThebioassaymethodsforBlattellagermanica 2026-05-25发布 2026-12-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布目 次 前言 Ⅲ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 规范性引用文件 1 ………………………………………………………………………………………… 3 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 4 试虫 1 ……………………………………………………………………………………………………… 4.1 敏感品系 1 …………………………………………………………………………………………… 4.2 待测种群 1 …………………………………………………………………………………………… 5 试剂 1 ……………………………………………………………………………………………………… 6 仪器设备 2 ………………………………………………………………………………………………… 7 测试条件 2 ………………………………………………………………………………………………… 8 敏感基线法 2 ……………………………………………………………………………………………… 8.1 原理 2 ………………………………………………………………………………………………… 8.2 操作步骤 2 …………………………………………………………………………………………… 8.3 死亡判断 3 …………………………………………………………………………………………… 8.4 数据处理 3 …………………………………………………………………………………………… 8.5 结果表述 3 …………………………………………………………………………………………… 8.6 结果判定 3 …………………………………………………………………………………………… 9 诊断剂量法 3 ……………………………………………………………………………………………… 9.1 原理 3 ………………………………………………………………………………………………… 9.2 操作步骤 3 …………………………………………………………………………………………… 9.3 死亡判断 4 …………………………………………………………………………………………… 9.4 数据处理 4 …………………………………………………………………………………………… 9.5 结果判定 4 …………………………………………………………………………………………… 附录A(资料性) 常用杀虫剂对敏感品系德国小蠊的致死剂量(浓度) 5 ……………………………… ⅠGB/T26352—2026前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替GB/T26352—2010《蜚蠊抗药性检测方法 德国小蠊生物测定法》,与GB/T26352— 2010相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下: a) 删除了术语“F1代”(2010年版的2.2),增加了术语“敏感品系”“待测种群”(见3.1和3.2),更 改了术语“诊断剂量”(见3.3,2010年版的2.1); b) 更改了试虫的要求(见第4章,2010年版的第3章); c) 更改了试剂的要求(见第5章,2010年版的第4章); d) 更改了仪器设备的要求(见第6章,2010年版的第5章); e) 更改了测试条件(见第7章,2010年版的第6章); f) 更改了敏感基线法中药膜法、点滴法的操作步骤(见8.2,2010年版的7.2); g) 更改了诊断剂量法中药膜法、点滴法的操作步骤(见9.2,2010年版的8.2); h) 增加了敏感基线法的数据处理(见8.4)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国国家卫生健康委员会提出并归口。 本文件起草单位:北京市疾病预防控制中心、扬州大学、中国农业大学、江苏省疾病预防控制中心、 陕西省疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、中国人民解放军军事科学院军事 医学研究院。 本文件主要起草人:曾晓芃、李静、周小洁、钱坤、高希武、褚宏亮、吕文、任东升、佟颖、董言德。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为: ———2011年首次发布为GB/T26352—2010; ———本次为第一次修订。 ⅢGB/T26352—2026蜚蠊抗药性检测方法 德国小蠊生物测定法 1 范围 本文件规定了德国小蠊(Blattellagermanica)对有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、新烟碱 类等杀虫剂抗药性检测时,试虫、仪器设备和测试条件的要求,描述了诊断剂量法和敏感基线法的生物 测定方法。 本文件适用于德国小蠊对杀虫剂抗药性的生物测定。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 敏感品系 susceptiblestrain 由于未曾接触过杀虫剂而保持对杀虫剂具有敏感状态,遗传上较均一的试虫种群。 3.2 待测种群 testpopulation 从野外(现场)特定地点和时间采集的、需要进行杀虫剂敏感性测试的目标昆虫群体。 3.3 诊断剂量 diagnosticdose 能杀死媒介生物敏感品系99%或99.9%个体的杀虫剂剂量[99%致死量(LD99)或99.9%致死量 (LD99.9)]或浓度值[99%致死浓度(LC99)或99.9%致死浓度(LC99.9)]的数倍。 注:用以区分敏感和抗性种群。 4 试虫 4.1 敏感品系 实验室标准化饲养的形态完整、活动灵敏、体型大小一致的雄性成虫。 4.2 待测种群 现场采集德国小蠊,室内饲养繁殖得到的形态完整、活动灵敏、体型大小一致的第一代(F1)或第二 代(F2)代雄性成虫。 5 试剂 丙酮(分析纯)或其他有机溶剂,二氧化碳或无水乙醚,杀虫剂原药,凡士林(分析纯)与液体石蜡(密 1GB/T26352—2026度:0.84g/mL~0.86g/mL)混合物(1∶1)。 6 仪器设备 具可控光照和温湿度的培养箱或房间,移液枪(管),500mL透明磨砂广口瓶,微量点滴器或微量 点滴仪。 注:广口瓶尺寸为高16cm,底部直径8cm,瓶口直径5.5cm,内表面积约为350cm2。 7 测试条件 7.1 温度:26℃±2℃。 7.2 相对湿度:(60±10)%。 8 敏感基线法 8.1 原理 依据杀虫剂使用浓度(剂量)的对数值和试虫死亡率机率值关系建立毒力回归方程,以敏感品系建 立的杀虫剂毒力回归线作为敏感基线,以待测试虫种群得到的杀虫剂毒力回归线与敏感基线对比,通过 比较由毒力回归线计算得到的致死中浓度(致死中量)[LC50(LD50)]的变化来确定待测种群抗性水平。 8.2 操作步骤 8.2.1 药膜法 8.2.1.1 预试验浓度的确定 8.2.1.1.1 用丙酮或其他适宜的溶剂将供试杀虫剂原药配成一定浓度的母液,结合试虫采集地点环境 和用药历史,使用相应溶剂将杀虫剂母液稀释成一定浓度的测试药液进行预试验。取测试药液2.5mL 加入500mL广口瓶中,立即不断转动广口瓶或用滚瓶机滚瓶,使药液均匀分布于瓶口磨砂表面以下所 有内壁,直至肉眼看不到液体流动,置于通风橱中待溶剂完全挥发。瓶口磨砂玻璃处涂抹凡士林与液体 石蜡混合物(1∶1),每瓶放试虫10头,接触1h后,将试虫移入清洁容器内正常饲养。24h后记录死 亡数。 8.2.1.1.2 每个浓度试验至少重复2次,以相应溶剂处理为对照组。根据试虫死亡率调整测试药液浓 度,直至最低浓度药液组试虫死亡率在0%~20%,最高浓度药液组试虫死亡率在80%~100%,将其作 为正式试验的杀虫剂浓度范围。 8.2.1.2 正式测定 根据预试验确定的杀虫剂浓度范围,使用相应溶剂将杀虫剂母液按等比或等差系列稀释成5个~ 7个浓度作为正式试验的测试药液。 每个浓度试验至少重复3次,以相应溶剂处理为对照组,药膜制备、试虫处理的具体操作同预试验。 8.2.2 点滴法 8.2.2.1 预试验浓度的确定 8.2.2.1.1 用丙酮或其他适宜的溶剂将供试杀虫剂原药配成一定浓度的母液,结合试虫采集地点环境 2GB/T26352—2026