书书书　 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜４ ２ ８ ３．６—２ ０ １ ５ 国境口岸微孔板基因芯片检测方法第６部分：１ ２种食源性致病菌 犜 犲 狊 狋犿 犲 狋 犺 狅 犱狅 犳犿 犻 犮 狉 狅 狆犾 犪 狋 犲犵犲 狀 犲犮 犺 犻狆犪 狋 犳 狉 狅 狀 狋 犻 犲 狉 狆狅 狉 狋—犘 犪 狉 狋６：犜 狑 犲 犾 狏 犲犳 狅 狅 犱犫 狅 狉 狀 犲 狆犪 狋 犺 狅犵犲 狀 犻 犮犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪 ２ ０ １ ５０ ５２ ６发布 ２ ０ １ ６０ １０ １实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局发 布 rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.书书书前　　言 　　Ｓ Ｎ／Ｔ４ ２ ８ ３《国境口岸微孔板基因芯片检测方法 》为系列标准 ，分为六个部分 ： — — —笫１部分：通用技术规程 ； — — —第２部分：结核分枝杆菌及 ｋ ａ ｔ Ｇ和ｒｐｏ Ｂ耐药变异基因 ； — — —第３部分：７种呼吸道病毒 ； — — —第４部分：肠道病毒及肠道病毒 ７ １型、柯萨奇病毒 Ａ １ ６型； — — —第５部分：肺炎支原体 、肺炎衣原体及嗜肺军团菌 ； — — —第６部分：１ ２种食源性致病菌 。本部分为 Ｓ Ｎ／Ｔ４ ２ ８ ３的第６部分。本部分按照 Ｇ Ｂ／Ｔ１． １—２ ０ ０ ９给出的规则起草 。请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。本部分起草单位 ：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局 、深圳市检验检疫科学研究院 、中华人民共和国河南出入境检验检疫局 、珠海精标仪器有限公司 。本部分主要起草人 ：赵芳、张勤、张树平、顾大勇、刘春晓、赵纯中、何建安、史蕾、徐云庆、李永进。 Ⅰ犛 犖／犜４ ２ ８ ３．６—２ ０ １ ５ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.国境口岸微孔板基因芯片检测方法第６部分：１ ２种食源性致病菌 １　范围 Ｓ Ｎ／Ｔ４ ２ ８ ３的本部分规定了国境口岸金黄色葡萄球菌 、沙门氏菌属 、大肠杆菌 Ｏ １ ５ ７∶Ｈ ７ 、志贺氏菌属、单增李斯特氏菌 、蜡样芽孢杆菌 、小肠结肠炎耶尔森氏菌 、弧菌属、副溶血弧菌 、霍乱弧菌 、梭菌属及弯曲杆菌属共 １ ２种食源性致病菌的微孔板基因芯片检测方法 。本部分适用于在国境口岸实验室采用微孔板基因芯片技术对上述 １ ２种食源性致病菌进行检测 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． １ 食品安全国家标准 　食品微生物学检验 　总则 Ｇ Ｂ１ ９ ４ ８ ９ 　实验室　生物安全通用要求 Ｓ Ｎ／Ｔ１ ５ ４ ３　食源性致病菌基因芯片鉴定方法 Ｓ Ｎ／Ｔ２ ７ ５ ２． ４ —２ ０ １ １　卫生检疫人员的自我防护规范 　第４部分：实验室人员 Ｓ Ｎ／Ｔ４ ２ ８ ３． １ 　国境口岸微孔板基因芯片检测方法 　第１部分：通用技术规程 ＷＳ２ ３ ３　微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 ３　术语和定义 Ｓ Ｎ／Ｔ４ ２ ８ ３． １ 和Ｓ Ｎ／Ｔ１ ５ ４ ３界定的以及下列术语和定义适用于本文件 。 ３．１食源性致病菌 　犳 狅 狅 犱犫 狅 狉 狀 犲 狆犪 狋 犺 狅犵犲 狀 犻 犮犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪食源性疾病中最常见的生物致病因素 ，感染后可引起细菌性食物中毒和感染性腹泻的一类细菌 。本部分主要涉及了 １ ２种常见的食源性致病菌 ，包括金黄色葡萄球菌 （犛 狋 犪狆犺狔犾 狅 犮 狅 犮 犮 狌 狊犪 狌 狉 犲 狌 狊 ） 、沙门氏菌属（犛 犪 犾 犿 狅 狀 犲 犾 犾 犪 ｓｐ ｐ．） 、大肠杆菌 Ｏ １ ５ ７∶Ｈ ７ （犈 狊 犮 犺 犲 狉 犻 犮 犺 犻 犪犮 狅 犾 犻 Ｏ １ ５ ７∶Ｈ ７ ） 、志贺氏菌属 （犛 犺 犻犵犲 犾 犾 犪ｓｐ ｐ．） 、单增李斯特氏菌 （犔 犻 狊 狋 犲 狉 犻 犪犿 狅 狀 狅 犮 狔狋 狅犵犲 狀 犲 狊） 、蜡样芽孢杆菌 （犅 犪 犮 犻 犾 犾 狌 狊犮 犲 狉 犲 狌 狊 ） 、小肠结肠炎耶尔森氏菌（犢 犲 狉 狊 犻 狀 犻 犪犲 狀 狋 犲 狉 狅 犮 狅 犾 犻 狋 犻 犮 犪 ） 、弧菌属（犞 犻 犫 狉 犻 狅ｓｐ ｐ．） 、副溶血弧菌 （犞 犻 犫 狉 犻 狅狆犪 狉 犪 犺 犪 犲 犿 狅 犾 狔狋 犻 犮 狌 狊） 、霍乱弧菌 （犞 犻 犫 狉 犻 狅犮 犺 狅 犾 犲 狉 犪 ） 、梭菌属（犆 犾 狅 狊 狋 狉 犻 犱 犻 狌 犿 ｓｐ ｐ．）及弯曲杆菌属 （犆 犪 犿狆 狔犾 狅 犫 犪 犮 狋 犲 狉 ｓｐ ｐ．） 。 ３．２金黄色葡萄球菌 　犛 狋 犪狆犺狔犾 狅 犮 狅 犮 犮 狌 狊犪 狌 狉 犲 狌 狊也称“金葡菌” ，属于葡萄球菌属 （犛 狋 犪狆犺狔犾 狅 犮 狅 犮 犮 狌 狊 ） ，为革兰氏阳性球菌 ，显微镜下排列成葡萄串状 ，无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜 。其广泛存在于自然界中 ，由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒 ，大约占整个细菌性食物中毒的三分之一 。 １犛 犖／犜４ ２ ８ ３．６—２ ０ １ ５ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.３．３沙门氏菌属 　犛 犪 犾 犿 狅 狀 犲 犾 犾 犪 狊狆 狆．具有共同特征的一大属革兰氏阴性肠道杆菌 ，菌体大小约 （０． ７μｍ～１． ５μｍ）×（２． ０μｍ～５． ０μｍ） ，周生鞭毛 ，兼性厌氧 。 ３．４大肠杆菌 犗 １ ５ ７∶犎 ７ 　犈 狊 犮 犺 犲 狉 犻 犮 犺 犻 犪犮 狅 犾 犻 犗 １ ５ ７∶犎 ７一种肠道出血性大肠杆菌 ，食物中毒的主要原因之一 。属于肠杆菌科埃希氏菌属 ，革兰氏阴性 ，无芽孢，有鞭毛。可产生大量的 Ｖ ｅ ｒ ｏ毒素（ＶＴ） ，也称作大肠埃希菌志贺样毒素 （Ｓ ｈ ｉｇａｔ ｏ ｘ ｉ ｎ） ，按免疫原性的不同可分为 Ｓ ｔ ｘⅠ，Ｓ ｔ ｘⅡ，是其主要致病因子 。 ３．５志贺氏菌属 　犛犺 犻犵犲 犾 犾 犪狊狆 狆．一类革兰氏阴性直杆菌 ，菌体大小约为 （０． ５μｍ～０． ７μｍ）×（２． ０μｍ～３． ０μｍ） ，无芽孢，无荚膜，无鞭毛，有的菌株有菌毛 。是人和灵长类的肠道致病菌 ，引起细菌性痢疾 。 ３．６单增李斯特氏菌 　犔 犻 狊 狋 犲 狉 犻 犪犿 狅 狀 狅 犮 狔狋 狅犵犲 狀 犲 狊革兰氏阳性短杆菌 ，大小约为 ０． ５μｍ×（１． ０μｍ～２． ０μｍ） ，直或稍弯 ，两端钝圆 ，常呈Ｖ字型排列 ，偶有球状 、双球状，兼性厌氧 、无芽孢。广泛存在于自然界中 ，能引起严重食物中毒 ，主要表现为败血症 、脑膜炎和单核细胞增多 。 ３．７蜡样芽孢杆菌 　犅 犪 犮 犻 犾 犾 狌 狊犮 犲 狉 犲 狌 狊又称仙人掌杆菌 ，革兰氏阳性 、β溶血性的杆状细菌 。菌体细胞杆状 ，末端方，成短或长链 ，大小约为（１． ０μｍ～１． ２μｍ）×（３． ０μｍ～５． ０μｍ） ，产芽孢。广泛存在于自然与食物中 ，在夏秋季极易引发食物中毒，主要症状为腹痛 、呕吐腹泻 。 ３．８小肠结肠炎耶尔森氏菌 　犢 犲 狉 狊 犻 狀 犻 犪犲 狀 狋 犲 狉 狅 犮 狅 犾 犻 狋 犻 犮 犪属肠杆菌科 ，为革兰阴性 、卵圆形粗短杆菌 ，可产生耐热肠毒素 。冬春发病较多见 ，主要是通过污染的饮水和食品经消化道传播 ，临床表现以急性胃肠炎 、小肠结肠炎和败血症等类型为主 。 ３．９弧菌属　犞 犻 犫 狉 犻 狅狊狆 狆．革兰氏阴性菌 ，形状短小 ，约０． ５μｍ×（１． ０μｍ～５． ０μｍ） ，因弯曲如弧而得名 。普遍存在于海洋 、河口与水生生物体 ，人常因进食未煮熟的污染本菌的海产品或盐渍食物 （蔬菜、肉类、蛋等）而受感染 。 ３．１ ０副溶血弧菌 　犞 犻 犫 狉 犻 狅狆犪 狉 犪 犺 犪 犲 犿 狅 犾 狔狋 犻 犮 狌 狊又称嗜盐菌 ，属于弧菌属 。该菌嗜盐畏酸 ，在无盐培养基上 ，不能生长 ，３％～６％食盐水繁殖迅速 。对人和动物均有较强的毒力 ，临床上以急性起病 、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状 。 ３．１ １霍乱弧菌 　犞 犻 犫 狉 犻 狅犮 犺 狅 犾 犲 狉 犪属于弧菌属 ，为需氧菌 ，营养要求不高 ，在ｐＨ８． ８～ｐＨ９． ０的碱性蛋白胨水或平板中生长良好 。共分为１ ３ ９个血清群 ，其中Ｏ １群和Ｏ １ ３ ９群可引起霍乱 ，主要表现为剧烈的呕吐 、腹泻、失水，死亡率甚高，属于国际检疫传染病 ，为我国的甲类法定传染病 。 ３．１ ２梭菌属　犆 犾 狅 狊 狋 狉 犻 犱 犻 狌 犿 狊狆 狆．革兰氏阳性大杆菌 ，又称梭状芽孢杆菌属或厌氧芽孢杆菌属 。菌体呈梭状 ，常排列成对或短链 ，圆 ２犛 犖／犜４ ２ ８ ３．６—２ ０ １ ５ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.的或渐尖的末端 。广泛分布在环境中 ，许多种可产生外毒素 ，如肉毒梭菌分泌的肉毒素 ，其毒力强 ，误食后严重时可导致呼吸困难和心力衰竭而死亡 。 ３．１ ３弯曲杆菌属 　犆 犪 犿狆 狔犾 狅 犫 犪 犮 狋 犲 狉 狊狆 狆．主要为螺旋形 、Ｓ形或弧形以及杆状细菌 。革兰氏阴性 ，菌体大小 （０． ２μ