书书书　 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜３ ８ ５ ０．２—２ ０ １ ４ 出口食品中多种糖醇类甜味剂的测定 —第２部分：气相色谱法 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狊 狌 犵犪 狉犪 犾 犮 狅 犺 狅 犾 狊 狑 犲 犲 狋 犲 狀 犲 狉 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊犳 狅 狉犲 狓狆狅 狉 狋—犘 犪 狉 狋２：犌 犆犿 犲 狋 犺 狅 犱 ２ ０ １ ４０ １１ ３发布 ２ ０ １ ４０ ８０ １实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局发 布 rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.书书书前　　言 　　本标准按照 Ｇ Ｂ／Ｔ１． １—２ ０ ０ ９给出的规则起草 。请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。本标准起草单位 ：中华人民共和国甘肃出入境检验检疫局 。本标准主要起草人 ：张雅珩、周围、王肃军、李斌、周小平、王波。 Ⅰ犛 犖／犜３ ８ ５ ０．２—２ ０ １ ４ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.出口食品中多种糖醇类甜味剂的测定 —第２部分：气相色谱法 １　范围 本标准规定了食品中赤藓糖醇 、木糖醇、甘露糖醇 、山梨糖醇和麦芽糖醇五种糖醇类甜味剂的气相色谱测定方法 。本标准适用于糖果 （包括口香糖 ） 、饼干、面包、牛奶、饮料（包括含乳饮料 ）等无糖食品中赤藓糖醇 、木糖醇、甘露糖醇 、山梨糖醇和麦芽糖醇含量的测定 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２　分析实验室用水规格和试验方法 ３　方法提要 用水提取样品中的糖醇 ，经净化、脱去水分后进行乙酰化反应 。生成的糖醇乙酸酯衍生物 ，用配有氢火焰离子化检测器的毛细管气相色谱仪进行测定 ，外标法定量 。 ４　试剂和材料 除另有说明外 ，所用试剂均为分析纯 ，水为Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２规定的一级水 。 ４．１　石油醚：沸程３ ０℃～６ ０℃。 ４．２　乙酸酐。 ４．３　无水吡啶 ：优级纯。 ４．４　犖，犖 二甲基甲酰胺 （ＤＭＦ） 。 ４．５　蔗糖。 ４．６　三氯乙酸 。 ４．７　三氯乙酸溶液 ：称取２． ５ｇ三氯乙酸加水溶解并定容至 １Ｌ，该溶液浓度为 ２． ５ｇ／Ｌ。 ４．８　糖醇标准品 ：纯度≥９ ９％，糖醇的基本信息参见表 Ａ． １。 ４．９　糖醇标准储备液 ：分别称取 ０． ２ ５ｇ（精确至０． １ｍｇ）赤藓糖醇 、木糖醇、甘露糖醇 、山梨糖醇和麦芽糖醇标准品用水溶解并定容至 ２ ５ｍＬ，各标准储备液的浓度为 １ ０ｍｇ／ｍＬ，在０℃～４℃冰箱中保存 。 ４．１ ０　混合标准工作溶液 ：分别移取赤藓糖醇 、木糖醇、甘露糖醇 、山梨糖醇和麦芽糖醇的标准储备溶液各１ ０． ０ｍＬ 于１ ０ ０ｍＬ 容量瓶中加水稀释至刻度 ，混匀。此溶液各标准物质浓度为 １． ０ｍｇ／ｍＬ，在 ０℃～４℃冰箱中保存 。 ５　仪器和设备 ５．１　气相色谱仪 ：配有氢火焰离子化检测器 。 １犛 犖／犜３ ８ ５ ０．２—２ ０ １ ４ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.５．２　分析天平 ，感量为０． １ｍｇ，０． ０ １ｇ。 ５．３　恒温加热反应器 ：控温范围在 ４ ０℃～９ ０℃可调，控温精度在 ±０． ５℃ 。 ５．４　冷冻离心机 ：转速不低于 １ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ。 ５．５　旋转蒸发仪 。 ５．６　涡旋混合器 。 ５．７　超声波发生器 。 ５．８　氮吹仪。 ５．９　冷冻研磨机 。 ５．１ ０　粉碎机。 ６　样品制备与保存 ６．１　饼干、面包类样品 取有代表性的样品至少 ２ ０ ０ｇ，用粉碎机粉碎 ，置于密闭的容器内 ，于４℃冰箱内保存 。 ６．２　糖果（含口香糖 ）类样品 取有代表性的样品至少 ２ ０ ０ｇ，冷冻研磨 ，置于密闭的容器内 ，于４℃冰箱内保存 。 ６．３　牛奶、饮料（包括含乳饮料 ）类样品 取有代表性的样品至少 ２ ０ ０ｇ，充分混匀 ，置于密闭的容器内 ，于４℃冰箱内保存 。 含二氧化碳的饮料要温热 ，搅拌除去二氧化碳或者超声脱气 。 ７　分析步骤 ７．１　样品提取 ７．１．１　饼干、面包类样品 称取样品 ０． ５ｇ～１ｇ（精确至０． ０ １ｇ）于５ ０ｍＬ离心管中 ；加入３ ０ｍＬ石油醚，涡旋１ｍ ｉ ｎ，冷冻离心 ３ｍ ｉ ｎ（转速１ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ，温度５℃） ，弃去石油醚层 ；重复以上步骤 ２～３次；离心管通氮气吹干残存的石油醚后加入 １ ０ｍＬ三氯乙酸溶液 ，涡旋１ｍ ｉ ｎ，冷冻离心 １ ０ｍ ｉ ｎ（转速１ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ，温度５℃） ，将清液通过滤纸过滤至 ５ ０ｍＬ鸡心瓶中 ：剩余残渣继续加入 ５ｍＬ三氯乙酸水溶液 ，涡旋１ｍ ｉ ｎ，冷冻离心 １ ０ｍ ｉ ｎ（转速１ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ，温度５℃） ，将清液过滤合并至鸡心瓶中 。 ７．１．２　牛奶、饮料类样品 称取样品 １ｇ（精确至０． ０ １ｇ）于５ ０ｍＬ离心管中 ；加入５ｍＬ水稀释（若为牛奶或含乳饮料 ，需加入 ５ｍＬ三氯乙酸溶液稀释 ） ，涡旋１ｍ ｉ ｎ，冷冻离心 ３ｍ ｉ ｎ（转速１ ００ ０ ０ｒ／ｍ ｉ ｎ，温度５℃） ，将清液通过滤纸过滤至５ ０ｍＬ鸡心瓶中 ；重复上述步骤 ，合并滤液于鸡心瓶中 。 ７．１．３　糖类样品 称取样品 １ｇ（精确至０． ０ １ｇ） ，用水溶解并超声后定容至 １０ ０ ０ｍＬ 。准确移取 ５． ０ｍＬ 溶解液于 ５ ０ｍＬ离心管中 ；涡旋１ｍ ｉ ｎ，冷冻离心 ３ｍ ｉ ｎ（转速１ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ，温度５℃） ，将清液通过滤纸过滤至 ５ ０ｍＬ鸡心瓶中 ；在残渣中加入 ５ｍＬ水，重复上述步骤 ，合并滤液于鸡心瓶中 。 ２犛 犖／犜３ ８ ５ ０．２—２ ０ １ ４ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.７．２　衍生 ７．２．１　样品的衍生 在鸡心瓶中加入 ６ ０ｍｇ蔗糖，溶解（注：若不需测定麦芽糖醇含量 ，可不加入蔗糖 ） ，在旋转蒸发仪上于８ ５℃减压除去水分后取下 。再用氮气吹干鸡心瓶中的残留水分 。在上述干燥物中 ，加入１． ０ｍＬ无水吡啶 ，１． ０ｍＬ ＤＭＦ ，１． ０ｍＬ 乙酸酐，用瓶塞密封瓶口后摇匀 ，待溶解完全后 （若溶解不完全 ，可在温水水浴中加热至完全溶解 ） ，将溶液全部转移至 ２ ０ｍＬ顶空瓶中 ，密封后置恒温加热反应器内 ９ ０℃下反应２ ０ｍ ｉ ｎ，反应期间每隔 ５ｍ ｉ ｎ摇动顶空瓶 。反应完毕取出冷却至室温 ，经０． ４ ５μｍ有机相滤膜过滤后，供气相色谱分析 。 ７．２．２　标准系列溶液的衍生 分别取适当体积混合标准工作溶液 ，分别加入 ６ ０ｍｇ蔗糖，溶解（注：若无法完全溶解 ，可加入适量水；若不需测定麦芽糖醇含量 ，可不加入蔗糖 ）后按照７． ２． １中“在旋转蒸发仪上于 ８ ５℃减压除去水分后取下……”操作。参考标准溶液系列 ：赤藓糖醇 、木糖醇、甘露糖醇 、山梨糖醇为 ０． ０ １ｍｇ／ｍＬ～１． ５ｍｇ／ｍＬ，麦芽糖醇为 ０． ０ ５ｍｇ／ｍＬ～１． ６ｍｇ／ｍＬ。 ７．３　测定 ７．３．１　气相色谱测定条件 气相色谱测定条件如下 ： ａ）　色谱柱：ＯＶ  １ ０ １ 石英毛细管柱 ，５ ０ｍ×０． ２ ５ｍｍ （内径）×０． ３ ３μｍ，或相当者 ； ｂ）　色谱柱程序升温条件 ：１ ９ ０℃保持２ｍ ｉ ｎ，以每分钟 １ ０℃升温至２ ５ ０℃保持２ｍ ｉ ｎ，再以每分钟 １ ０℃升温至２ ８ ５℃保持２ ５ｍ ｉ ｎ； ｃ）　进样口温度 ：２ ７ ０℃； ｄ）　检测器温度 ：２ ７ ０℃； ｅ）　载气：高纯氮，纯度≥９ ９． ９ ９ ９％ ，恒流模式 ：１． ２ｍＬ／ｍ ｉ ｎ；氢气流量 ：４ ５ｍＬ／ｍ ｉ ｎ，空气流量 ： ４ ５ ０ｍＬ／ｍ ｉ ｎ； ｆ）　尾吹气：４ ５ｍＬ／ｍ ｉ ｎ； ｇ）　进样方式 ：分流进样 ，分流比：５ ０∶１； ｈ）　进样量：１μＬ。 ７．３．２　气相色谱测定 ７．３．２．１　按上述色谱条件 （７． ３． １）下测定标准系列溶液的响应峰面积 。以响应峰面积为纵坐标 ，标准系列溶液的浓度为横坐标 ，绘制工作曲线并计算回归方程 。 ７．３．２．２　按上述色谱条件 （７． ３． １）下测定样品的响应峰面积 （应在仪器检测的线性范围内 ） 。依据测定的响应峰面积 ，在标准工作曲线上查出 （或用回归方程计算出 ）样品中赤藓糖醇 、木糖醇、甘露糖醇 、山梨糖醇和麦芽糖醇的含量 。 ７．３．２．３　在上述色谱条件下 ，赤藓糖醇 、木糖醇、甘露糖醇 、山梨糖醇和麦芽糖醇衍生物的参考保留时间分别为６． ０ ２ ４ｍ ｉ ｎ 、８． ３ ９ ６ｍ ｉ ｎ 、１ ０． ７ ４ ６ｍ ｉ ｎ 、１ ０． ８ ３ １ｍ ｉ ｎ 和２ ８． ２ ９ ３ｍ ｉ ｎ 。其标准品衍生物的气相色谱图参见图Ｂ． １。 ７．３．３　气相色谱 质谱确证 样品在气相色谱仪测定时 ，如果检出色谱峰的保留时间与标准品衍生物相一致 ，则需对其进行质谱 ３犛 犖／犜３ ８ ５ ０．２—２ ０ １ ４ rHgCb@g · ykbûR60
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