以正式出版文本为准中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3847 —2019 代替 SN/T 3847— 2014、SN/T 2220— 2008 出口食品中苯二氮卓类药物残留量的测定 液相色谱 - 质谱 /质谱法 Determination of benzodiazepines residues in foodstuffs for export — LC-MS/MS method 2019 -12-27 发布 2020 -07-01 实施ICS 67.050 C 53 中华人民共和国海关总署 发 布以正式出版文本为准以正式出版文本为准 SN/T 3847—2019I前 言 本标准按照 GB /T 1.1— 2009 给出的规则起草。 本标准代替 SN /T 3847—2014《出口食品中苯二氮卓类药物的测定 液相色谱 - 质谱 / 质谱法》和 SN/T 2220-2008《进出口动物源性食品中苯二氮卓类药物残留量检测方法 液相色谱 - 质谱质 谱 法 》。 本标准与 SN /T 3847— 2014 和 SN /T 2220— 2008 相比，主要技术变化如下： ——标准名称修改为“出口食品中苯二氮卓类药物残留量的测定 液相色谱 - 质谱 / 质谱法” 。 — —修改了适用范围和化合物种类。SN /T 3847— 2014 和 SN /T 2220— 2008 的适用范围分别为 保健食品和动物源性食品，本标准同时适用于保健食品和动物源性食品中苯二氮卓类药物的检测， 并增加了鱼肉、鸡肉、鸡蛋、牛奶、蜂蜜、肠衣等基质。与 SN /T 3847— 2014 相比，增加了化合物 α- 羟基阿普唑仑；与 SN /T 2220 —2008 相比，增加了普拉西泮、去甲西泮、替马西泮、氯巴占、硝 西泮、氯甲西泮、艾司唑仑、劳拉西泮、氯硝西泮等化合物。 — —本标准将 SN /T 3847— 2014 和 SN /T 2220 —2008 测定步骤合并，并做了适当修改，如将 SN/T 2220 — 2008 标准中提取溶液的 pH 值改为 11.0。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国重庆海关、中华人民共和国上海海关、中华人民共和国厦门 海关。 本标准主要起草人：李贤良、郗存显、陈念念、唐柏斌、曾静、任硕、邓晓军、徐敦明。本标准所代替标准的历次版本发布为：—— SN /T 2220 — 2008 ； —— SN /T 3847 — 2014。以正式出版文本为准以正式出版文本为准1 SN/T 3847—2019出口食品中苯二氮卓类药物残留量的测定 液相色谱 - 质谱 / 质谱法 1 范围 本标准规定了出口保健食品和动物源性食品中普拉西泮、去甲西泮、氯氮卓、替马西泮、三唑 仑、氯巴占、奥沙西泮、硝西泮、氟西泮、氯甲西泮、阿普唑仑、艾司唑仑、劳拉西泮、氯硝西泮、 氟硝西泮、地西泮、咪达唑仑、去烷基氟西泮、去甲基氟硝西泮、 α- 羟基咪达唑仑、7- 氨基氟硝西 泮、2- 羟乙基氟西泮、 α- 羟基阿普唑仑等苯二氮卓类药物的液相色谱 - 质谱 /质谱检测方法。 本标准适用于保健食品（片剂、冲剂、胶囊、糖浆、口服液等剂型）中苯二氮卓类药物含量和动 物源性食品（猪肉、猪肝、鱼肉、鸡肉、鸡蛋、牛奶、蜂蜜、肠衣等）中苯二氮卓类药物残留量的测 定和确证。 2　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3　方法提要 保健食品试样中的苯二氮卓类药物用二氯甲烷 - 乙醚混合溶液提取，提取液经浓缩后，液相色 谱 - 串联质谱仪测定，内标法定量。 动物源性食品试样中的苯二氮卓类药物采用 β- 盐酸葡萄糖醛苷酶水解，在碱性条件下用乙酸乙 酯 - 异丙醇混合溶液提取，阳离子交换小柱净化后，液相色谱 - 串联质谱仪测定，内标法定量。 4　试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合 GB /T 6682 规定的一级水。 4.1　甲醇：高效液相色谱级。 4.2　乙腈：高效液相色谱级。4.3　甲酸：高效液相色谱级。4.4　二氯甲烷：高效液相色谱级。4.5　乙酸铵。4.6　乙酸乙酯。4.7　异丙醇。4.8　乙醚。4.9　冰乙酸。4.10 　无水硫酸钠：650 ℃灼烧 4 h，冷却后贮于密闭容器中备用。 4.11 　硼砂（Na 2B4O7·10H2O ）。以正式出版文本为准2 SN/T 3847—20194.12 　氢氧化钠。 4.13 　浓盐酸：浓度为 12 mol /L。 4.14 　氨水：浓度为 28 %。 4.15 　β- 盐酸葡萄糖醛苷酶溶液：活力≥ 100 000 units /mL。 4.16 　乙酸铵缓冲溶液：0.02 mol /L，pH = 5.2。称取 1.54 g 乙酸铵（4.5）溶解于 900 mL 水中，用冰 乙酸（4.9）调节 pH 值到 5.2±0.1，最后用水稀释到 1 L，贮存于 4 ℃冰箱中，使用期为 1 个月。 4.17 　2 mol /L 氢氧化钠溶液：称取 8 g 氢氧化钠（4.12）溶于 90 mL 水中，冷却至室温，用水定容至 100 mL。 4.18 　硼砂 - 氢氧化钠缓冲液：称取 7.6 g 硼砂 （4.11） 溶解于 900 mL 水中，用 2 mol/L 氢氧化钠溶液 （4.17） 调节 pH 值到 11.0±0.1，最后用水稀释到 1 L。 4.19 　二氯甲烷 - 乙醚溶液：取 200 mL 二氯甲烷（4.4） ，加入 800 mL 乙醚（4.8） ，混匀。 4.20 　乙酸乙酯 - 异丙醇溶液：取 1 000 mL 乙酸乙酯（4.6） ，加入 200 mL 异丙醇，混匀。 4.21 　乙腈 - 水溶液：取 20 mL 乙腈（4.2） ，加入 80 mL 水，混匀。现配现用。 4.22 　0.1 mol /L 盐酸溶液：准确量取 9 mL 浓盐酸（4.13） ，用水稀释到 1 L，摇匀后备用。 4.23 　乙腈 - 氨水溶液：取 98 mL 乙腈（4.2） ，加入 2 mL 氨水（4.14） ，混匀。使用前配制。 4.24 　2 mmol /L 乙酸铵溶液（含 0.2 % 甲酸） ：准确称取 0.154g 乙酸铵（4.5） ，用适量水溶解，加入 2 mL 甲酸（4.3） ，用水稀释至 1 000 mL，混匀。4.25 　苯二氮卓类药物标准物质：标准物质信息见附录 A。标准物质均为 1.0 mg /mL 的甲醇（4.1） 溶液，同位素内标标准物质为 100.0 μg/mL 甲醇（4.1）溶液。 4.26 　标准中间溶液：用乙腈（4.2）分别稀释标准物质溶液至终浓度约为 1.0 μg/mL 和 100.0 ng /mL， 低于 5 ℃保存，有效期为 6 个月。 4.27 　同位素内标标准工作溶液：用乙腈（4.2）分别稀释同位素内标标准溶液至终浓度为 100.0 ng /mL， 低于 5 ℃保存，有效期为 6 个月。 4.28 　标准工作液：根据需要，临用时吸取一定量的标准中间溶液（4.26）和同位素内标工作溶液 （4.27） ，用乙腈 - 水溶液（4.21）稀释配制成适当浓度的标准工作溶液（参考线性浓度范围为 1.0 ng / mL 至 50.0 ng /mL） ，每毫升标准工作溶液含有同位素内标物质各 10.0 ng。现配现用。 4.29 　混合阳离子交换小柱：3 mL，60 mg 或相当者，使用前用 5 mL 甲醇（4.1）和 5 mL 水活化。 4.30 　微孔滤膜：0.22 μm，有机系。 5　仪器和设备 5.1　高效液相色谱 - 质谱 / 质谱仪：配电喷雾离子源（ESI） 。 5.2　电子天平：感量为 0.01 g 和 0.1 mg。 5.3　超声波清洗器。5.4　涡旋混合器。5.5　恒温箱。5.6　氮吹仪。5.7　离心机：转速 5 000 r /min 以上。 5.8　组织捣碎机。5.9　容量瓶：10 mL、50 mL、100 mL。5.10 　具塞塑料离心管：50 mL。以正式出版文本为准3 SN/T 3847—20196　试样的制备与保存 6.1　胶囊、片剂、冲剂：取有代表性样品约 100 g，用碾钵碾碎（胶囊、片剂同时将糖衣和胶囊壳碾 碎） ，装入洁净容器内，密封并做好标识，于常温保存。6.2　糖浆、口服液：取有代表性样品约 100 g，搅拌均匀后装入洁净容器内，密封并做好标识，于 4 ℃ 冰箱内保存。 6.3　肌肉、内脏、肠衣、鸡蛋：取有代表性样品约 500 g，用组织捣碎机捣碎，装入洁净容器内，密封并做好标识，于 -18 ℃冰箱内保存。 6.4　牛奶、蜂蜜：取有代表性样品约 500 g，搅拌均匀后装入洁净容器内，密封并做好标识，于 4 ℃ 冰箱内保存。 7　测定步骤 7.1 提取 7.1.1　保健食品（胶囊、片剂、冲剂、糖浆、口服液） 准确称取 2 g 试样 （精确到 0.01 g） 于 50 mL 具塞离心管中，加入 10 mL 硼砂 - 氢氧化钠缓冲液 （4.18） ， 用 2 mol /L 的氢氧化钠溶液 （4.17） 调节 pH 值至 11.0 左右，添加 100.0 ng /mL 的同位素内标工作溶液 （4.27） 100 μL 于待测样品中，加入 20 mL 二