SN-T 3846-2014 出口苹果和浓缩苹果汁中碳同位素比值的测定

书书书　中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜３８４６—２０１４出口苹果和浓缩苹果汁中稳定碳同位素比值的测定犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犮犪狉犫狅狀犻狊狅狋狅狆犲狉犪狋犻狅犻狀犪狆狆犾犲犪狀犱犪狆狆犾犲犼狌犻犮犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犳狅狉犲狓狆狅狉狋２０１４０１１３发布２０１４０８０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.书书书前　　言　　本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国陕西出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：张遴、蔡砚、李高华、范春林、梁靓、李毅然。 Ⅰ犛犖／犜３８４６—２０１４ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.出口苹果和浓缩苹果汁中稳定碳同位素比值的测定１　范围本标准规定了稳定同位素比质谱法测定苹果和浓缩苹果汁中果汁、果糖、果肉稳定碳同位素比值的方法。本标准适用于苹果和浓缩苹果汁中果汁、果糖、果肉稳定碳同位素比值的测定。２　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法（ＧＢ／Ｔ６６８２—２００８，ＩＳＯ３６９６：１９８７，ＭＯＤ）。３　方法提要苹果和浓缩苹果汁中果汁、果糖、果肉经制备后进入元素分析仪燃烧氧化，经化学纯化及ＧＣ分离后用稳定同位素比质谱仪测定稳定碳同位素比（１３Ｃ／１２Ｃ），通过与标准物质的比较确定果汁、果糖、果肉 δ１３Ｃ值。４　试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。４．１　氢氧化钙。４．２　丙酮：≥９９．５％。４．３　硫酸：９５％～９８％（质量分数）。４．４　０．１ｍｏｌ／Ｌ硫酸：取２．８ｍＬ硫酸（４．３）用水稀释至５００ｍＬ。４．５　橄榄油标准：犆＝５４．００％，δ１３ＣＰＤＢ＝－２８．５１±０．１６‰ 。（ＣａｔＮｏ．Ｂ２１７２  Ｂａｔｃｈ３１３０）。４．６　吸附剂（ＣｈｒｏｍｏｓｏｒｂＷ３０  ６０Ｍｅｓｈ）。４．７　锡杯：８ｍｍ×５ｍｍ。５　仪器５．１　稳定同位素比质谱仪，δ１３Ｃ测定精度：０．１‰。载气：氦气，纯度９９．９９９％；助燃气：氧气，纯度９９．９９９％。５．２　天平：感量为０．０１ｍｇ。５．３　离心机：大于３０００ｒ／ｍｉｎ。５．４　食品料理机。５．５　５μＬ移液器。５．６　离心管（耐有机溶剂）：体积５０ｍＬ。１犛犖／犜３８４６—２０１４ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.６　样品制备６．１　果汁样品的制备６．１．１　将苹果去皮去籽取其可食部分，切碎，放入料理机，打成浆状。浓缩果汁直接用原汁，无需处理。６．１．２　用移液器吸取果汁或果浆（６．１．１）２μＬ于锡杯中，可先在锡杯中加入少量吸附剂（４．６），将锡杯密封备用，每个样品制备两个。６．２　果糖样品的制备６．２．１　将苹果去皮去籽取其可食部分，切碎，放入料理机，打成浆状。将浓缩果汁加水复原。６．２．２　取５０ｍＬ果汁或果浆（６．２．１）于离心管中，在转速大于３０００ｒ／ｍｉｎ下离心１０ｍｉｎ，取上层清液于另一离心管中（下层的果肉可用于果肉样品的制备），加２ｇ氢氧化钙（４．１）搅匀，在９０℃的水浴中加热３ｍｉｎ，趁热离心，倒出上层清液，用硫酸（４．４）酸化至溶液的颜色发生变化（ｐＨ值约为５）。将溶液置于４℃的冰箱里过夜（大约１５ｈ），离心，取上层清液于７５℃烘箱中干燥３ｈ至果糖为不流动黏稠状液体。６．２．３　用移液器吸取２μＬ上述果糖试样于锡杯中密封备用，每个样品制备两个。６．３　果肉样品的制备６．３．１　将苹果去皮去籽取其可食部分，切碎，放入料理机，打成浆状。将浓缩果汁加水复原。６．３．２　取５０ｍＬ果汁或果浆（６．３．１）于离心管中，在转速大于３０００ｒ／ｍｉｎ下离心１０ｍｉｎ，弃去上层清液（上层的果汁也可用于果糖样品的制备），加４０ｍＬ水搅拌５ｍｉｎ，离心，弃去上层清液，这个过程重复３次。然后加入４０ｍＬ丙酮（４．２）搅拌５ｍｉｎ，离心，弃去丙酮，这个过程重复３次。将清洗后的果肉在７５℃烘箱中干燥，得到均匀的白色或灰色固体。注：为了得到有价值的结果，用水和丙酮彻底清洗是很有必要的。这能确保夹杂的糖和液体物质能够被除去。如果浆没有彻底洗净，那些液态物质将造成浆中 δ１３Ｃ值为可疑数据。６．３．３　称取干燥后的果肉２．５ｍｇ于锡杯中密封备用，每个样品制备两个。７　测定步骤７．１　标准参照物移取２μＬ橄榄油标准（４．５）于锡杯中，密封备用。７．２　同位素质谱仪的预调确认同位素质谱仪的工作环境、气密性、离子源的真空度均符合要求，然后检验其稳定性和峰形，必要时调整离子源参数值，确认数据采集系统设备正确，必要时进行调整。仪器工作条件参见附录Ａ。７．３　测定将制备好的样品依次放在自动进样器上，在计算机控制下，依次测定橄榄油标准和待测试料。通过相应的同位素族１３Ｃ／１２Ｃ的信号强度测定比值。测定完毕后，试料的δ１３Ｃ值由计算机自动计算给出。同一样品的 δ１３Ｃ值应在相同的仪器条件下测定。８　精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过０．３０‰。２犛犖／犜３８４６—２０１４ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.附　录　犃（资料性附录）仪器工作条件１）稳定同位素比质谱仪工作条件： — — —ＥＡ工作条件：ａ）　氧气流量：０．１４ＭＰａ；ｂ）　氦气流量：０．１４ＭＰａ；ｃ）　燃烧管温度：１０００℃ ；ｄ）　还原管温度：６００℃；ｅ）　ＧＣ温度：１００℃； — — —ＭＳ工作条件：ａ）　二氧化碳调谐气流量：０．２ＭＰａ；ｂ）　调节进入离子源的氦气流量，使得离子源内１２Ｃ的信号值在１～２Ｅ  ６：ｃ）　高电压ＨＴ：２２４２Ｖ；ｄ）　聚焦率Ｆｏｃｕｓ：８７％；ｅ）　阱电流Ｔｒａｐ：１００μＡ；ｆ）　电子能量ｅＶ：－７９．９９Ｖ；ｇ）　离子推斥电压ＩＲ：－２．８９３Ｖ。１）　非商业性声明：附录Ａ所列参数是在ＥＡ  Ｓ１Ｈｙｄｒａ２０  ２０型元素分析稳定同位素比质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。犛犖／犜３８４６—２０１４ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.书书书４１０２—６４８３犜／犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行　业　标　准出口苹果和浓缩苹果汁中稳定碳同位素比值的测定ＳＮ／Ｔ３８４６—２０１４ 中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲２号（１０００２９）北京市西城区三里河北街１６号（１０００４５）总编室：（０１０）６８５３３５３３网址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 开本８８０×１２３０１／１６　印张０．５　字数６千字２０１４年１１月第一版　２０１４年１１月第一次印刷印数１—１３００ 书号：１５５０６６·２  ２７４４９　定价１４．００元 rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.