ICS 67.080.10 CCSB31 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3943—2021 水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇 的测定离子色谱法 Determination of glucose, fructose, sucrose and sorbitol in fruits byion chromatographymethod 2021-11-09 发布 2022-05-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3943—2021 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》和GB/T 20001.4一2015《标准编制规则第4部分：试验方法标准》的规定起草， 请注意本文件某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由农业农村部种植业管理司提出。 本文件由全国果品标准化技术委员会（SAC/TC501)归口。 本文件起草单位：中国农业科学院果树研究所、青岛农业大学、青岛市现代农业质量与安全工程重点 实验室、山东农业工程学院。 本文件主要起草人：聂继云、匡立学、李静、张建一、高贯威、李银萍、李海飞、秦旭。 I NY/T3943—2021 水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的测定 离子色谱法 1范围 本文件规定了水果中葡萄糖、果糖、熊糖和山梨醇测定的离子色谱法。 本文件适用于水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的含量测定 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 文件。 RD GB/T6682 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语 S 4原理 试样用甲醇 茶小柱 定： 保留时间定 性，峰面积外标法 5试剂或材料 除非另有说明 6682规定的 CEI 5.1甲醇(CH,O, 5.2氢氧化钠溶 Napt 5.3200 mmol/L 化钠 统氧化钠溶酒 ml 00mL。 5.4葡萄糖(C.H12 05号 准物质 书的标准物质。 5.5果糖（C,H12O 度头 990 子标准物质 书的标准物质。 5.6燕糖（C2H2O,C 纯度为99% 或经国家认证开授标准物 证书的标准物质。 5.7山梨醇(CHuO,CA .50-70-4 物质证书的标准物质。 5.8标准储备液（1.0mg/ml 分别称取葡萄糖 5）、燕糖（5 山梨醇（5.7)各50mg（精 确至0.1mg）于4个50mL容量瓶中，用水溶解并定容，配制成1.0mg/mL的标准储备液。4℃下保存， 有效期1个月。 5.9标准工作溶液：分别量取0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL葡萄糖、果糖、 蔗糖标准储备液（5.8）和0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.20mL山梨醇标准储备液 （5.8）于6个100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，配置成4种糖组分的混合标准溶液，混合标准溶液中葡 萄糖、果糖、糖的浓度分别为5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、30.0mg/L、40.0mg/L、50.0mg/L， 山梨醇的浓度分别为2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L、10.0mg/L、12.0mg/L。 5.10固相萃苯取小柱：反相C1s固相萃取小柱，200mg/6mL，或性能相当者。 6仪器设备 6.1离子色谱仪：脉冲安培检测器，Au工作电极。 6.2电子天平：感量0.01g、0.1mg。 NY/T3943—2021 6.3冷冻研磨仪。 6.4超声波清洗机：频率不低于40kHz。 6.5离心机：转速不低于9000r/min。 6.6固相萃取装置。 7试样的制备 取干净果实代表性的可食部分250g，适当切分，液氮冷冻，研磨成粉末，一18℃以下储存备用。 8分析步骤 8.1试样溶液的制备 称取5g（精确至0.01g)均匀试样至50mL离心管中，加人30mL甲醇（5.1)混匀，40kHz的频率下 室温超声提取20min，9000r/min离心15min，上清液转移至50mL容量瓶中，残渣再用10mL甲醇 （5.1)按上述步骤重复提取1次，合并2次提取液，用甲醇（5.1)定容至刻度，摇匀，得到样品提取液。吸取 1.00mL样品提取液于50mL容量瓶中，用水定容至刻度。依次用5mL甲醇（5.1）和5mL水预淋洗、 活化固相萃取小柱（5.10）。吸取5mL稀释后的样品提取液加入活化好的固相萃取小柱中过滤净化，弃 去2mL初始滤液，收集滤液供离子色谱分析测定。 8.2离子色谱参考条件 色谱柱：阴离子交换柱（PA10），250mmX4.0mm； b) 柱温：30℃； c) 流动相：A为水，B为200mmol/L氢氧化钠溶液（5.3)； d) 流速：1mL/min； e) 进样量：10μL； 工作电极：Au电极； g) 参比电极：Ag/AgCl参比电极； h) 检测池温度：30℃； 洗脱条件按表1设置。 表1洗脱条件 时间，min A,% B,% 0 76 24 15 76 24 15.5 0 100 18 0 100 19 76 24 27 76 24 8.3标准工作曲线绘制 按照8.2设定的色谱工作条件，待仪器稳定后，依次测定系列标准工作溶液（5.9)中葡萄糖、果糖、蔗 糖和山梨醇的色谱峰面积。以系列标准工作溶液（5.9)中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的浓度为横坐标，以 相应峰面积为纵坐标，绘制葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的浓度-色谱峰面积标准曲线，标准品色谱图见附 录A。 8.4试样溶液的测定 当试样溶液注人离子色谱仪中，得到峰面积。根据标准曲线得到待测液中葡萄糖、果糖、燕糖和山梨 醇的浓度。若试样溶液中测定组分浓度超过标准曲线上限，应稀释至标准曲线浓度范围后再行测定。 8.5空白试验 除不加入试样外，采用完全相同的分析步骤进行测定。 2 NY/T3943—2021 9结果计算和表述 试样中葡萄糖、果糖、燕糖或山梨醇的含量按公式(1)计算 (C-Co)XVX J (1) m×10000 式中： 试样中葡萄糖、果糖、燕糖或山梨醇的含量的数值，单位为克每百克（g/100g)； c 试样溶液中葡萄糖、果糖、蔗糖或山梨醇的浓度的数值，单位为毫克每升（mg/L)； Co 空白溶液中葡萄糖、果糖、煎糖或山梨醇的浓度的数值，单位为毫克每升（mg/L)； V 提取液体积的数值，单位为毫升（mL）； 试样溶液稀释倍数； m 试样的质量的数值，单位为克（g）； 10000 换算系数。 计算结果≥10.0g/100g时，保留3位有效数字；计算结果<10.0g/100g时，保留2位有效数字。 10 精密度 在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的15%。 在再现性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的20%。 11检出限和定量限 当称样量为5g时，水果中山梨醇的检出限为0.015g/100g，葡萄糖、果糖、蔗糖的检出限均为 0.0030g/100g；水果中山梨醇的定量限为0.050g/100g，葡萄糖、果糖、蔗糖的定量限均为0.010g/100g。 3 NY/T3943—2021 附录A (资料性） 葡萄糖、果糖、蔗糖、山梨醇标准品的离子色谱图 葡萄糖、果糖、燕糖、山梨醇标准品的离子色谱图见图A.1。 nC 120 BR 利醇标 准品的离子色 NY/T 3943-2021 全国农业食品标准 公共服务 中华人民共和国 农业行业标准 水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的测定 离子色谱法 NY/T3943—2021 * 食典通 中国农业出版社出版 （北京市朝阳区麦子店街18号楼） （邮政编码：100125 网址：www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行 各地新华书店经销 * * * 开本880mmX1230mm1/16 印张0.75 字数15千字 2022年2月第1版 2022年2月北京第1次印刷 书号：16109·8811 定价：24.00元 版权专有侵权必究 NY/T3943—2021 举报电话：（010）59194261