ICS 65.020.01 CCS B 15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3939.6—2021 甘薯主要病害抗性鉴定技术规程 第6部分：疮痴病 Technical code of practice for identification of resistance to sweetpotato diseases- Part6:Sweetpotatoscab 2021-11-09发布 2022-05-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3939.6—2021 典通 公共服育 食具 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 NY/T3939—2021《甘薯主要病害抗性鉴定技术规程》分为6个部分： 第1部分：黑斑病； 第2部分：茎线虫病； 第3部分：根腐病； 第4部分：蔓割病； 第5部分：薯瘟病； 第6部分：疮痴病。 本文件是NY/T3939一2021《甘薯主要病害抗性鉴定技术规程》的第6部分。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：江苏徐淮地区徐州农业科学研究所（江苏徐州甘薯研究中心）、福建省农科院作物研 究所。 本文件主要起草人：谢逸萍、邱思鑫、刘中华、张鸿、孙厚俊、张成玲、杨冬静、马居奎、黄立飞、谢睿寰、 唐伟。 I NY/T3939.6—2021 甘薯主要病害抗性鉴定技术规程 第6部分：疮痴病 1范围 本文件规定了甘薯疮痴病抗性鉴定的鉴定方法、病情调查与数据计算、抗病性评价、有效性判断。 本文件适用于甘薯疮痴病抗性鉴定 2规范性引用文件 其中，注日期的引用文 本文件。 Q GB4406种薯 3术语和定义 下列术语和定义适 纹件 3. 1 甘薯疮痴病 sweetpotato scah 由甘薯狮 Ftino batatas Saw.Yiegas 袋腔 &Jencen引起在嫩梢幻 片 柄和藤蔓形成 圆形至椭圆或 形灰白 间突起呈疣状木质化后形成疮 开裂而凹凸不 平。叶片发病 曲畸形 间内卷用严重的皱缩变小；嫩梢和顶芽受害后缩短， 直立不 仲长或卷缩呈木耳 状；茎蔓发病初期为褐色刚 3. 2 D 抗病性diseaser resistance 植物体所具有的能够减轻或抵御病原体致病作用的可遗传的性状 R 3.3 病情级别 disease rating seale 人为量化植物个体或群体发病程度的数值描述 3. 4 病情指数 disease inde 通过对植株个体发病程度（病情级别）数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述。 4鉴定方法 4.1 鉴定材料准备 将符合GB4406要求的种薯在无病苗床排种育苗，薯苗离苗床土层5cm剪下，长度20cm～25cm。 每品种剪取3组薯苗，每组15株，挂上名称、编号、试验重复的标牌，备用。 4.2培养基制备 4.2.1洋葱培养基 洋葱100g，去皮切碎加蒸馏水500mL，煮沸15min，纱布过滤，取滤液加琼脂16g，补足蒸馏水至 1000mL，pH7.2,121℃高压灭菌25min。 4.2.2胡萝卜培养基 胡萝卜100g，去皮洗净切碎加蒸馏水500mL，煮沸15min，纱布过滤，取滤液加蔗糖20g，琼脂16g。 T NY/T3939.6—2021 蒸馏水定容至1000mL，pH7.2,121℃高压灭菌25min。 4.3病原菌分离及保存 采集具有甘薯疮痴病典型症状的病茎2cm~4cm，75%酒精消毒2min，2%次氯酸钠消毒5min，在 超净工作台中于病斑边缘取2mm²～5mm²大小的组织块至含100μg/mL链霉素的洋葱培养基上， 纯复壮及保存方法见附录A。 4.4接种液制备 取胡萝卜平板培养7d10d的疮疝病病菌，加人无菌水30mL洗下孢子，配制成5×10*CFU/mL 悬浮液，备用。 4.5接种与栽种管理 4.5.1接种 4月～5月，温度稳定在20℃以上时接种。将待鉴定薯苗假植于接种苗床，约15d后用上述配制好 的孢子悬浮液喷雾至叶面显润而不滴水，盖膜保持湿度100%。 4.5.2栽种及管理 接种5d后将薯苗移栽至鉴定圃，起垒栽种，距75cm～85cm，株距20cm～25cm。每品种每处理 裁15株，3次重复，随机区组排列。同时栽种抗病对照和感病对照。栽种后正常管理。栽后30d开始调 查病害发生情况，每处理调查分枝蔓20个～25个，每隔10d调查1次，至感病对照品种病情指数达60 以上。 5病情调查与数据计算 5.1病情调查 以植株的分枝蔓为单位作病情分级，分级标准如下： 0级：目测无症状； 一1级：茎或叶有少数病斑，但叶片能正常展开； -3级：1/3以下的分枝蔓叶片受害皱缩； 5级：1/3~2/3的分枝蔓叶片受害皱缩： -7级：2/3以上的分枝蔓叶片受害皱缩扭曲或部分叶片变黄脱落，新梢畸形，嫩叶皱缩； -9级：分枝蔓病斑密布、枯死或叶片全部脱落、顶芽枯死。 5.2数据计算 依据病情调查情况，按公式（1)计算病情指数，精确至0.1。 Z(N;Xi) DI= X100 (1) MX9 式中： DI 病情指数； N; 第i病害级别的枝蔓数； i 病情级别值； M 调查的总枝蔓数。 6抗病性评价 根据病情指数评价甘薯疮痴病抗病性，将甘薯品种划分为高抗、抗病、中抗、感病、高感5个抗性类型， 评定标准如下： 高抗：病情指数<10.0； 抗病：10.0<病情指数≤30.0； -中抗：30.0<病情指数50.0； 2 NY/T3939.6—2021 感病：50.0<病情指数≤70.0； 高感：70.0<病情指数≤100。 7有效性判断 感病对照品种病情指数≥60时，该批次鉴定视为有效。评价品种抗病性应是2年鉴定一致的结果 若鉴定结果不一致，以抗性级别低的结果为准。 3 NY/T3939.6—2021 附录A （资料性） 甘薯疮痴病病原菌提纯复壮及保存方法 A.1病原菌复壮 将分离纯化的病原菌接种于胡萝卜培养基平板上，28℃培养约10d，待孢子形成后，用无菌纯水洗孢 子，孢子悬浮液用双层沙布过滤，检查滤液中的孢子含量，并用无菌水将孢子配置成5×101CFU/mL的 悬浮液。将配制好的孢 子悬浮液喷雾至盆展苗叶品湿润而不滴水置于 工气候箱中，28℃，保持湿度 100%。观察植株的发病情况，出现典型症状后再从发病部位分离纯化病原菌，培养后再按上述方法接种 到甘薯疮痴病感病 品种新 种 级 则其接种的病原菌可用作 甘薯抗疮痴病鉴 A.2病原菌保存 A.2.1 斜面低温保氟 将上述强致 女病力廿 善疮痴病病原用试管斜面培养基，28培养 等长 好无污染的病菌菌 丝的斜面试管艺 塞部分用油纸包扎好放置一冰箱保有备川每个月转 株培养及保存过程要 A.2.2甘油冷冻保藏 将上达强致病力疮痴病病原菌手胡萝卜平板上 无菌纯 出孢子，孢子悬浮 液用双层沙 少布过滤，离心 奔上清用无菌水将孢子配 的悬浮 加人灭菌甘油，混 均，使用甘油的浓 浓度为 管每个 70℃或液氮保存。 用该法保藏的菌木 株用于抗性鉴定时需先用培养基进荐活化培养 培养出孢 接种新种花进行致病力 检测。该方法适合病原菌的中 长期菌种保藏，保藏时间3年左千 NY/T3939.6—2021 附录B (资料性） 对照品种的选择 本文件中对照品种应选择日前生产上认可度一致的甘薯疮痴病抗病和感病品种，以“广薯88-70”作 为抗病对照品种，以“新种花”作为感病对照品种为宜。 新种花：20世纪50年代中期，福建省安溪县湖头镇农民育种家陈罗庚培育出的甘薯新品种，感甘薯 疮疝病。 抗甘薯疮痴病。 5