ICS 65.020.01 CCS B 15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3938—2021 梨树腐烂病抗性鉴定技术规程 Technical code of practice for identification of resistance to pear canker diseases 2021-11-09发布 2022-05-01实施 中华人民共和国农业农村部 5发布 NY/T3938—2021 食典通 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：中国农业科学院郑州果树研究所。 本文件主要起草人：周增强、王丽、侯珲、袁洪波、杨健 I NY/T3938—2021 梨树腐烂病抗性鉴定技术规程 1范围 本文件规定了梨树抗腐烂病鉴定的接种体制备、苗圃和梨苗的准备、田间人工接种、病情调查、抗性评 价及鉴定结果报告。 本文件适用于梨不同品种、育种资源、野生资源、杂交群体对腐烂病的抗性鉴定和评价。 2规范性引用文件 本文件没有规范性引用 艾件 3术语和定义 3. 1 A 梨树腐烂病 Valsa Canker cofpear 由梨黑腐皮壳菌 3. 2 病原分离物 pathogen hicisolate 采用常规组织 分园医 植物发病部位分离 3.3 接种菌饼 ctlateddisk 用于人工接种 的含有接种体节 3. 4 U 病情级别 lis 人为界定植物 本或群 3.5 抗性评价 根据采用的技术标准确定植物 抗 4接种体制备 4.1病原物分离 以常规组织分离法，从发病梨枝干的典型病斑的 分离并纯化梨树腐烂病病原菌。分离物 经形态学观察、分子鉴定和柯赫氏法则验证，确认为梨树腐烂病病原菌后，评价其致病性，选取致病力中等 菌株，于4℃下保存备用 4.2接种体繁殖 将4℃低温保存的梨树腐烂病病原菌菌种接种在PSA培养基上，置于培养箱中26℃下培养4d～ 5d，用直径5mm打孔器沿菌落边缘打成菌饼备用。其中，PSA培养基配方为：马铃薯200g，蔗糖20g， 琼脂15g~20g，蒸馏水1000mlL 5苗圃和梨苗的准备 鉴定圃的设置：选择试验基地建立鉴定圃，鉴定圃远离果园。人工接种鉴定设在温室1年～2年生盆 栽苗或假植苗中进行。温室温度控制在20℃～35℃，湿度控制在60%～80%。特殊情况下在苗圃或田 1 NY/T3938—2021 间成龄树等活体植株上，将待检材料嫁接，待嫁接材料长出45cm～50cm新梢后接种检测。按照常规方法 栽植梨苗，进行常规水肥管理。在试验期间，一般不使用杀菌剂。确需防治有害生物，尽可能避开检测观察 期，首先选用保护性杀菌剂，要做好施药记录，记录药剂使用的种类、使用剂量、使用时期及施药方法等。 对照品种：鉴定中选择一个感病品种，要求高感梨树腐烂病且稳定性好，选择标准为在正常年份接种 后其病情指数达50.0或以上。一般可选用“早红考密斯”品种或本地区的感病品种。 6田间人工接种 接种实验设计：选取健康、长势一致当年生枝条或嫁接材料。枝条生长到45cm～50cm时开始接 种，每枝条选取距基部10cm到距新梢顶部10cm～15cm枝段接种，每隔7cm~10cm接种一个点。接 种区待检材料与对照品种随机排列或顺序排列，每小区接种20个点，重复3次。 接种方法：于当年8月～9月、翌年3月～4月共进行2次接种梨苗，接种前将需接种健康梨苗的枝条 表面用75%乙醇或0.5%次氯酸钠溶液消毒，再用直径5mm打孔器在枝条上每间隔7cm~10cm打孔， 孔深至木质部，每孔上各接一个梨腐烂病菌菌饼，再用脱脂棉沾无菌水缠绕，外用宽1cm左右的封口膜缠 绕保湿培养，以健康树枝条接种琼脂块为对照。调查时解开封口膜去除脱脂棉及接种体，做好标记。 7病情调查 7.1调查时间和方法 于每次接种后30d，调查每个接种点发病情况，记录病斑直径长度、枝条死亡状况。 7.2病情级别划分 梨树腐烂病在梨树枝条上病斑直径长度及其相对应的分级标准见表1。 表1梨树腐烂病在梨树枝条发病分级标准 单位为厘米 病情级别 严重度划分标准 0级 不发病 1级 病斑直径长度≤1.00 3级 1.00<病斑直径长度<2.00 5级 2.00<病斑直径长度3.00 7级 3.00<病斑直径长度≤4.00 9级 病斑直径长度>4.00或枝条死亡或叶片枯菱 7. 3 3调查结果统计方法 病斑数 发病率（%)= 总斑数 X100 (1) ≥(各级病斑数×相应病级数值) 病情指数(DI)： X 100 (2) 总斑数X最高病级数值 8抗性评价 8.1抗性类别划分 人工接种抗性类别划分标准见表2。 表2 梨树腐烂病抗性评价标准 病情指数(DI) 抗性水平 DI=0. 00 免疫(I) 0.00<DI20.00 高抗（HR) 20.00<DI≤30.00 抗病(R) 30.00<DI≤40.00 感病(S) DI>40.00 高感(HS) 2 NY/T3938—2021 8. 2 重复鉴定 抗性评价一般重复2年，2年试验结果趋势不一致的情况下进行第3年试验，以2年接近的结果作为 最终评价依据。 8.3鉴定有效性判别 感病品种对照或任一鉴定品种的病情指数达到50.0或以上，该批次鉴定有效。 9 鉴定结果报告 田间人工接种鉴定一般以鉴定品种对特定生态区域内菌株的反应出具鉴定结果报告单。鉴定报告单 般以单个品种出具，如集中批量送样的，也可以对多份品种出具一个报告单。鉴定结果原始记录表格式 按附录B中的B.1，鉴定结果报告单格式按附录B.2的规定执行。 3 NY/T3938—2021 附录A (资料性） 梨树腐烂病病原菌的信息 A.1梨树腐烂病病原菌 梨树腐烂病病原菌学名（Va lsupyri)：属于子囊菌门：球壳菌目，黑腐皮壳属，梨黑腐皮壳菌 A.2 梨树腐烂病病原菌形态学特征 梨树腐烂病病原 菌无性 De 形成浅黑色至黑色、扁圆锥形 的子座，子座可突 表皮 形状不规 分生孢 抱子 般有多个腔室，多个腔 室共用一个孔口 分 X（1~1.2）μm。分生 孢子在相对湿 ~35℃之间能萌发 温度 范围为20℃～30℃， 最适pH为4 NY/T3938—2021 附录B （规范性） 鉴定结果记录表和报告单 B.1记录表 梨品种（材料)抗腐烂病鉴定结果记录表见表B.1。 表B.1梨品种（材料)抗腐烂病鉴定结果记录表 鉴定地点： 接种时间： 调查时间： 品种（材料） 不同病级病斑数 发病率 病情指数 编号 重复 名称 0级 1级 3级 % (DI ) 5级 7级 7级 9级 检测人： 校核人： 审核人： 年 月 日 年 月 日 年月 日 B.2报告单 梨品种（材料)抗腐烂病鉴定结果报告单见表B.2。 5